免疫学技术在生物行业是无可替代的随着相关技术的快速发展,其对精度的要求也越来越高,显然,一般的酶测技术已逐渐无法适应这种形势下的新需求。
一、正在发生怎样的转变?
如今,发展的主流已经不再是用放射性同位素标记的测定方法(避免污染环境及对人体损害)而是转向于能在任何地方操作快速均相和固相测定终将趋向于能够枪测到皮克或是10负18摩尔级的、非同位素的、自动或半自动的实验室测定技术发光免疫分析技术顺应了这一潮流,开创了免疫诊断的新纪元。
二、认识免疫发光技术
发光免疫分析,是一种灵敏度高、特异性强、检测快速及无放射危害的分析技术。化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统。
▼化学发光分析系统
是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子(hM),利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
▼免疫反应系统
是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上,或酶作用于发光。
三、走近免疫发光技术
化学发光酶免疫分析系统采用辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体或抗原,在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶(HRP)标记复合物,这时加入鲁米诺发光剂,产生化学发光。
四、作为化学发光剂的条件
发光的量子产率高,物理化学特性要与被标记测定的物质相匹配,能与抗原或抗体形成稳定的偶联结合物,其化学发光常是氧化反应的结果,在所使用的浓度范围内对生物体无毒性。